Lataa esitys
Esittely latautuu. Ole hyvä ja odota
JulkaistuIsmo Mattila Muutettu yli 7 vuotta sitten
1
Preimplantaatiodiagnostiikka Jaana L ä hdetie L ää ketieteellinen genetiikka Turun yliopisto
2
PGD taustaa ensimm ä inen raportti 1990 laboratorioiden m ää r ä n kasvu hidasta, t ä ll ä hetkell ä n. 50, 17 maassa tutkittavien tautien m ää r ä n kasvu nopeaa IWG perustettu 1990 ESHRE PGD Consortium 1997 valvoo, kehitt ää ja auttaa PGD laboratorioita
3
PGD:n tarve perinn ö llisen taudin riski autosomaalisen dominantin, resessiivisen tai X- kromosomaalisen taudin riski kromosomipoikkeavuuden riski jo koetut raskauden keskeytykset jos raskauden keskeytys ei tule kyseeseen infertiliteetti i ä n aiheuttama aneuploidiariski
4
Alkiodiagnostiikan menetelmi ä alkiobiopsia yleens ä 4-8 soluasteella 3. p ä iv ä n kohdalla yksitt ä isen solun analysointi FISH-menetelm ä t PCR-menetelm ä t blastomeerin fuusioiminen hiiren tai naudan munasoluun kromosomianalyysi
5
PGD (ESHRE) 1997-1998 323 pariskuntaa, 392 PGD-sykli ä 302 alkionsiirtoa 66 raskautta yhteens ä tietoja syntyneist ä 79 PGD- raskauden lapsesta raskauskomplikaatioita 17 % ennenaikainen synnytys 27 % yksisiki ö isill ä 13 % kaksosilla 73 %
6
Alkiodiagnostiikan tarkkuus (ESHRE) 61 siki ö t ä ja 11 vastasyntynytt ä 21 istukkan ä ytett ä, 38 lapsivesin ä ytett ä yhteens ä 68:ssa 70 tapauksesta tulos varmistui oikeaksi yksi trisomia 16 l ö ytyi, haettu X-kromosomaalista incontinentia pigmenti -tautia yksi dystrofia myotonica siki ö l ö ytyi -> raskaudenkeskeytys (1.4 % virhediagnoosin riski)
7
FISH-menetelm ä t indikaatioalueet: kromosomipoikkeavuudet sukupuolen m ää ritys (X-kromos.taudit) kromosomikoettimia usein ainakin 5 13, 18, 21, X ja Y ongelmat: mosaikismi translokaatiot vaativat r ää t ä l ö idyt koettimet
8
PCR-menetelm ä t strategioita yhden solun geenin PCR:ss ä sis ä kk ä iset alukkeet (nested PCR) koko genomin monistus ensin, esim. PEP ongelmia alleelispesifinen monistuminen tai toisen alleelin “ poisputoaminen ” (ADO) huomattava kontaminaatioriski
9
Fluoresoiva PCR k ä ytet ää n fluoresoivalla leimalla varustettuja alukkeita PCR-tuotteet analysoidaan esim. sekvensaattorilla alleelien kokoero todetaan, esim. CF, DM soveltuu monen taudin diagnostiikkaan herkkyys ja nopeus suurempi alleelispes. monistuminen v ä h ä isemp ää
10
Kvantitatiivinen PCR monistetaan valikoituja kromosomi- spesifisi ä mikrosatelliitteja multiplex-PCR k ä ytet ää n fluoresoivia alukkeita analysoidaan PCR-tuotteet automaatti- sekvensaattorilla lasketaan piikkien pinta-alasta alleelien suhteet (normaali 1:1, trisomia 2:1)
11
Vertaileva genominen hybridisaatio CGH ei viel ä k ä yt ö ss ä 1) alkiosolusta monistetaan koko genomi ja leimataan esim. vihre ä ksi 2) terveen henkil ö n genominen DNA leimataan esim. punaiseksi molemmat hybridisoidaan yhdess ä kromosomi- preparaattiin lasilla mikroskoopin kuva-analysaattori laskee vihre ä /pun.- fluoresenssin suhteen: liikaa vihre ää = esim. ylim ää r ä inen kromosomi liikaa punaista = puuttuva kromosomi
12
DNA-sirut vaatii koko solun DNA:n monistamisen siru on yl. kaupallisesti tuotettu ja siin ä on haluttu kokoelma tunnistettavien tautien mutaatioita, esim. Suomi-siru kromosomik ä sivarsisiru (tulossa) DNA-passi (?) siru luetaan automaattisella kuva- analysaattorilla
13
Kromosomisto esiin uudella tavalla yhdest ä solusta Willadsen ym. 1999 ihmisen blastomeeri fuusioidaan naudan munasolun kanssa –2 translokaatiopotilasta –87 solua 64 metafaasia –1 terve siki ö Verlinsky ja Evsikov 1999 ihmisen blastomeeri fuusioidaan hiiren tsygootin kanssa 191 solua, 138 metafaasia (74 %)
14
I ä n perusteella tehty alkiodiagnostiikka kyseess ä pikemminkin seulonta joissakin keskuksissa jo t ä rkein indikaatioryhm ä geneettinen riski suhteellisen pieni indikaatio: raskaaksitulon mahdollisuuden parantaminen lapsettomuushoidossa
15
PGD - tarve ja kustannukset arvioitu Englannissa 1999: tarjonta 128 PGD:a /vuosi kysynt ä 256 PGD:a / vuosi saatavuus ep ä tasaista henkil ö - ja laitekustannukset perustaminen 139 000 puntaa k ä ytt ö kulut/vuosi 55 000 puntaa
16
Kloonaaminen ja alkiodiagnostiikka alkiotutkijat ja genetiikot vastuussa p ää tett ä v ä indikaatioista lailliset, moraaliset ja eettiset rajat kokonaisen ihmisen kloonaaminen kiellet ää n ‘ varaosien ’ tuottamisen mahdollisuus sairaiden solujen, kudosten jopa kokonaisten elinten korvaaminen
Samankaltaiset esitykset
© 2024 SlidePlayer.fi Inc.
All rights reserved.